पहला स्ट्रैंड सीडीएनए सिंथेसिस पावरस्क्रिप्ट आरटी सुपरमिक्स

पॉवरस्क्रिप्ट आरटी सुपरमिक्स

केवल अनुसंधान के लिए उपयोग करें

अवयव

भंडारण

इस अभिकर्मक को -20°C पर रखा जाना चाहिए और यह 2 वर्षों के लिए वैध है।

विवरण

पॉवरस्क्रिप्ट आरटी सुपरमिक्स एक अनुकूलित 5X रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन मिश्रण है जिसमें दो-चरणीय आरटी-क्यूपीसीआर वर्कफ़्लो में पहले स्ट्रैंड सीडीएनए संश्लेषण के लिए आवश्यक सभी सामग्रियां शामिल हैं।इसमें थर्मोस्टेबल रिवर्स ट्रांसक्रिपटेस होता है, जो उच्च तापमान पर सीडीएनए संश्लेषण का समर्थन करता है।इसमें टेम्पलेट आरएनए को क्षरण से बचाने के लिए म्यूरिन-व्युत्पन्न आरएनएएस अवरोधक भी शामिल हैं।मिश्रण में रैंडम हैक्समर और ओलिगो डीटी प्राइमर होते हैं, जो विभिन्न प्रकार के आरएनए का रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन पूरी तरह से कर सकते हैं।यह उत्पाद आरएनए की एक-प्रतिलिपि जितनी कम मात्रा में रिवर्स ट्रांसक्राइब कर सकता है, और परिणामी सीडीएनए उत्पाद क्यूपीसीआर डिटेक्शन के लिए एक आदर्श टेम्पलेट है, जो डिटेक्शन की संवेदनशीलता और सटीकता सुनिश्चित करता है।

आवेदन

पहला स्ट्रैंड सीडीएनए संश्लेषण।

मैटर्सएनईडिंगएध्यान

• सफल सीडीएनए संश्लेषण उच्च गुणवत्ता वाले आरएनए से होता है।उच्च गुणवत्ता वाले आरएनए को कम से कम पूर्ण लंबाई की अखंडता की गारंटी देनी चाहिए और इसमें ईडीटीए या एसडीएस जैसे रिवर्स ट्रांसक्रिपटेस के कोई अवरोधक नहीं होने चाहिए।
• पता लगाने के लिए आवश्यक आरएनए की मात्रा रुचि की प्रतिलेख की प्रचुरता पर निर्भर करती है।सामान्य तौर पर, अनुशंसित कुल आरएनए 1 एनजी से 1 μg या एमआरएनए 0.1 एनजी से 100 μg है।
• ऑपरेशन के दौरान, RNase की शुरूआत के कारण RNA क्षरण को रोकने के लिए सावधानी बरतनी चाहिए।आरएनए को -70 डिग्री सेल्सियस पर संग्रहित करना और बार-बार जमने और पिघलने से बचना सबसे अच्छा है।
• जीनोमिक डीएनए या अतिरिक्त उत्पाद की उपस्थिति लक्ष्य आरएनए की सटीक मात्रा निर्धारण में हस्तक्षेप कर सकती है, खासकर कम-कॉपी लक्ष्यों के लिए।नो आरटी नियंत्रण प्रतिक्रिया को 1 मिनट के लिए 95 डिग्री सेल्सियस पर पावरस्क्रिप्ट आरटी सुपरमिक्स के थर्मल निष्क्रियता और फिर टेम्पलेट आरएनए जोड़कर अनुकरण किया जा सकता है।इसके अलावा, यह प्रदर्शित करने के लिए एक एनटीसी (कोई टेम्पलेट नियंत्रण नहीं) प्रतिक्रिया स्थापित की जानी चाहिए कि रिवर्स ट्रांसक्रिप्शन सार्थक है।
• सीडीएनए उत्पादों को -20 डिग्री सेल्सियस पर या उससे नीचे संग्रहित किया जाना चाहिए और बार-बार फ्रीज-पिघलने से बचना चाहिए।

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